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        威斯騰公眾號

        動物醫學實驗
        慢性抑郁型/EAE動物模型

        時間:2020-07-17 17:07:00 瀏覽:2128次


                人類疾病的動物模型在醫學科學研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經過十余年的發展,累積了豐富的動物培養和模型構建經驗,在動物模型構建方法上摸索出獨有經驗,常規動物模型構建平均成功率98%以上,重難點模型(開胸/開顱術等)構建平均成功率75%以上,形成了高效高質量的動物模型構建方法庫,可成功構建上百種疾病動物模型。


        慢性抑郁型動物模型

        抑郁是一種以情緒低落,思維遲鈍,行為遲緩為主要癥狀的精神疾病,同時可伴有睡眠減少,體重降低等軀體癥狀。
        模型制作:慢性溫和的不可預知性應激(chronicmildstress,CMS)由Katz等 于1981年創立,但缺點較多,如過強的 應激刺激常導致動物死亡。由Willner等對其進行改進,是目前應用和研究較多的一種抑郁癥模型。讓大鼠在2~4周內每天經歷一種不愉快的輕度應激,包括冷水游泳(4℃,5min),電擊(電流強度1.0mA,頻率1次/分),熱環境(45℃,5min),日夜顛倒,閃光刺激(頻率3次/分),禁食,禁水,夾尾(1min)等刺激。每種刺激形式不連續2天出現,形成一種CMS,避免動物對同一種刺激產生適應。
        模型行為評分

        目前尚無公認的經典測量抑郁情緒的測驗,在各種抑郁模型動物中主要通過以下試驗測量抑郁水平:多用敞箱試驗進行行為測評,表現為大鼠自發性探究行為明顯減弱,運動能力降低。體重減輕、性行為減少、血漿中糖皮質激素升高,睡眠周期紊亂。同時發現老鼠天生偏好糖水的興趣下降,運用糖水消耗試驗測定24h飲用1%蔗糖溶液的量,若糖水消耗顯著降低,表示抑郁模型造模成功。
        模型評價:

        抑郁模型可用于抗抑郁藥物的篩選及抑郁病理生理機制的研究,因其采用的刺激因子類似人在生活中經歷的應激事件強度,較好地模擬了人類快感缺乏、興趣降低這一核心癥狀,并且模型穩定持久,作為抑郁應激模型是理想的。


        小鼠EAE模型制備

        適應性喂養

        實驗小鼠自購回后保持其自由飲水、進食,溫度23-25℃,動物房12h-12h晝夜交替,適應性喂養一周后進入實驗。

        EAE造模

        實驗鼠稱重,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉(0.5ml/100g),背部備皮,酒精棉球消毒后各小鼠分別于背部中線兩側皮下4點注射抗原乳劑(MOG35-55)0.2ml。免疫當天(第0d)及48h(第2d)分別給模型各組小鼠腹腔注射PTX每只500ng(0.2ml)。誘導小鼠產生EAE。


        威斯騰實驗服務流程



        威斯騰生物服務項目

        分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
        實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
        免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
        ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
        生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
        雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
        染色質免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
        GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
        SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
        高血壓模型
        病毒包裝 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
        過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
        過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
        逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
        腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
        肝炎-肝硬化-肝癌模型
        蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
        細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
        BioPlex懸浮芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
        生長因子芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
        炎癥因子芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
        血管生成因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
        凋亡因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
        趨化因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
        HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 基因編輯動物
        電生理相關服務 動物整體實驗服務
        膜片鉗實驗
        細胞生物學檢測 高通量測序 代謝組學
        細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
        MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
        細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
        細胞周期檢測 RNA-Seq測序
        細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
        Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
        流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
        CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
        臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
        藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
        細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
        細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
        細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
        細胞成管實驗
        病理檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
        掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
        透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
        HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
        免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
        Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
        激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
        免疫熒光
        Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
        原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
        熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
        特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
        行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
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        重復性刻板行為檢測 細胞高內涵藥物篩選平臺 心血管系統藥物藥效學評價
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        生物膜片鉗藥物篩選平臺 抗炎免疫藥物藥效學評價
        常規藥物體外篩選


        【本平臺合作項目】
        分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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