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        動物醫學實驗
        大鼠心肌梗死/脊髓損傷模型

        時間:2020-07-17 17:06:00 瀏覽:2188次


        人類疾病的動物模型在醫學科學研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經過十余年的發展,累積了豐富的動物培養和模型構建經驗,在動物模型構建方法上摸索出獨有經驗,常規動物模型構建平均成功率98%以上,重難點模型(開胸/開顱術等)構建平均成功率75%以上,形成了高效高質量的動物模型構建方法庫,可成功構建上百種疾病動物模型。


        SD大鼠心肌梗死模型

        通過結扎左冠狀動脈前降支(LAD)制作心肌梗死模型。實驗鼠稱重,7%水合氯醛按5ml/kg 行腹腔注射麻醉,頸部、胸部備皮,用酒精棉球對手術區消毒,頸部正中切口,鈍性分離兩側肌肉暴露氣管,于大鼠口腔行氣管插管后接小動物呼吸機,保持呼吸穩定后在左胸前第3、4肋間作橫切口,依次鈍性分離各層肌肉,小心剪開肋間肌,暴露心臟后撕破心包膜,擠出心臟在左心耳的右緣下1-2mm處、肺動脈圓錐左緣處用圓針穿過左冠狀動脈前降支下方的心肌表層,用5-0線結扎,結扎成功后,可觀察到結扎血管以下心室壁稍變白,立即將心臟放入胸腔并縫合胸腔,用注射器將胸腔內空氣抽出,確定無開放性氣胸后依次縫合胸壁各層組織。大鼠術后恢復自主呼吸后拔除氣管插管。


        大鼠脊髓損傷實驗動物模型

        實驗鼠自購回后動物房12h-12h晝夜交替,保持大鼠自由飲水、進食,溫度23-25℃,適應性喂養一周后進入實驗。

        Wistar大鼠稱重,采用7%水合氯醛5ml/kg腹腔注射麻醉后,俯臥位固定于手術臺上,以T10棘突為中心,備皮,酒精消毒后取背部正中切口,長約2cm,依次切開皮膚、皮下組織,切開并分離脊柱兩側肌肉及筋膜,顯露T9~T11椎體棘突及椎板。然后用止血鉗小心咬除T10及附近棘突與椎板,暴露并保持硬脊膜的完整。用2.2×5mm弧形面與脊髓接觸,壓迫為質量50g的重物,壓迫時間5min,大鼠雙后肢癱瘓證明造模成功。逐層縫合肌肉及皮膚。

        BBB(大鼠脊髓損傷)評分標準:

        0分:無可見后肢運動

        1分:一或兩個關節輕微運動,通常為髖和/或膝關節

        2分:一個關節廣泛活動或一個關節廣泛活動且有另一關節輕微活動

        3分:兩個關節廣泛活動

        4分:后肢全部三個關節可輕微活動

        5分:兩個關節輕微活動,第三個關節可廣泛活動

        6分:兩個關節廣泛活動,第三個關節可輕微活動

        7分:后肢全部三個關節可廣泛活動

        8分:非承重情況下可以爪掌面著地

        9分:間或爪掌面承重支撐或爪背面承重移動,無爪掌面支撐移動

        10分:偶見爪掌面承重移動;無前后肢協調動作

        11分:可較多的見到掌面承重移動,但無前后肢協調動作

        12分:可較多的見到掌面承重移動,偶見前后肢協調動作

        13分:常見掌面承重移動,可常見前后肢協調動作

        14分:有持續性掌面承重移動和前后肢協調動作;或出現常見的掌面移動,持續型前后肢協調動作,偶有爪背側移動

        15分:持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作,前肢前進過程中無或歐有抓地;初接觸時主動爪位置與身體平行

        16分:步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作,前肢前進過程中常見爪抓地;初接觸時主動爪位置與身體平行,負重轉移后旋轉。

        17分:步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作,前肢前進過程中常見爪抓地;初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行。

        18分:步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作,前肢前進過程中可持續性爪抓地;初接觸時主動爪位置均與身體平行,負重轉移后旋轉。

        19分:步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作,前肢前進過程中可持續性爪抓地;初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行。尾巴有時或總是下垂。

        20分:持續性掌面移動,持續性協調步態,足趾持續抓地,初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行,軀干不穩定,尾巴持續翹起。

        21分:持續性掌面移動,持續性協調步態,足趾持續抓地,活動過程中主動爪位置始終與身體平行,軀干持續穩定,尾巴持續翹起。

        威斯騰實驗服務流程



        威斯騰生物服務項目

        分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
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        免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
        ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
        生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
        雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
        染色質免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
        GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
        SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
        高血壓模型
        病毒包裝 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
        過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
        過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
        逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
        腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
        肝炎-肝硬化-肝癌模型
        蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
        細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
        BioPlex懸浮芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
        生長因子芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
        炎癥因子芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
        血管生成因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
        凋亡因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
        趨化因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
        HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 基因編輯動物
        電生理相關服務 動物整體實驗服務
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        MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
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        細胞周期檢測 RNA-Seq測序
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        Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
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        臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
        藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
        細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
        細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
        細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
        細胞成管實驗
        病理檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
        掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
        透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
        HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
        免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
        Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
        激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
        免疫熒光
        Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
        原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
        熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
        特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
        行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
        曠場實驗 高通量自動藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
        重復性刻板行為檢測 細胞高內涵藥物篩選平臺 心血管系統藥物藥效學評價
        動物跑臺檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
        強迫游泳 分子藥理研究平臺 內分泌系統藥物藥效學評價
        生物膜片鉗藥物篩選平臺 抗炎免疫藥物藥效學評價
        常規藥物體外篩選


        【本平臺合作項目】
        分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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