在線客服
        在線客服
        服務時間:8:30~17:30
        客服熱線
        400-675-6758
        客服服務熱線
        關注微信

        威斯騰公眾號

        CRISPR/Cas9細胞敲除/入
        CRISPR/Cas9 基因敲除技術

        時間:2020-07-17 16:41:00 瀏覽:2584次


        CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats),即成簇規律間隔的短回文重復序列,是細菌和古細菌為應對病毒和質粒不斷攻擊而演化來的獲得性免疫防御機制,廣泛存在于眾多原核生物基因中,其中II型為CRISPR/Cas免疫系統,依賴Cas9內切酶家族靶向和剪切外源DNA。

        Cas9蛋白是一種能夠降解DNA分子的核酸酶(nuclease),其中含有兩個酶切活性位點,每一個位點負責切割DNA雙螺旋中的一條鏈。CRISPR在大約40%的細菌和90%的古細菌(archaea)的基因組中均有存在,它依賴crRNA (CRISPR RNA能夠與tracrRNA配對,形成雙鏈RNA結構,這種雙鏈RNA分子能夠介導Cas9核酸內切酶對與雙鏈RNA分子互補結合的DNA序列進行切割) 和tracrRNA (trans-activating chimeric RNA, 即反式激活嵌合RNA,一種非編碼RNA,能夠促進 crRNA的形成,是Cas9蛋白發揮RNA介導的DNA切割作用必不可少的輔助因子)對外源DNA進行特異的識別,然后使用Cas9對外源DNA進行序列特異性地切割降解,從在細菌和古細菌細胞發揮了一種獲得性免疫的作用。

        CRISPR系統間區序列的多樣性和特異性已被廣泛應用于基因分型、流行病學研究、分析不同人體內的細菌菌群差異、檢測環境中的噬菌體等科學研究。利用CRISPR系統作用機制的獨特性用于構建噬菌體抗性的工業生產菌株。CRISPR系統還可能廣泛應用于:作為遺傳操作的工具,用于靶向基因沉默;rRNA-Cascade復合物可用于體外DNA、RNA分子的位點特異性切割;在臨床上,通過限制質粒結合轉移而控制藥物抗性基因在致病菌之間擴散等。最近有多項研均表明,RNA介導的Cas9系統可以被用于對人類和小鼠細胞,以及細菌或斑馬魚胚胎進行基因組改造的工作當中( Martin et al. Science.2012;Mali P,Science.2013;Cong L,Science.2013)。

        與其它基因組工程技術比較,CRISPR/Cas9技術擁有以下技術優勢:

        (1) 無物種限制,靶向精確性更高,可實現對靶基因多個位點同時敲除;

        (2) 使用更方便,費用更低:Cas蛋白不具特異性,只需合成一個sgRNA就能實現對基因的特異性修飾。

        (3) CRISPR/Cas9系統可避免超長、高度重復的TALENs編碼載體帶來的并發癥。

        威斯騰生物Cas9團隊成立于2011年,目前擁有利用TALEN和CRISPR/Cas9技術完成細菌基因的敲除/敲入、細胞基因的敲除/敲入、動物個體(大小鼠、豬等模式動物)的基因敲除/敲入等先進技術手段,曾為全國各科研院所及中科院系統提供CRISPR/Cas9技術相關服務,完成40余例動物個體基因敲除。威斯騰生物戰略合作平臺——美國國立衛生研究院(National Institutes of Health,NIH),團隊成員曾于Nature等國際一流科研雜志發表大量CRISPR/Cas9相關研究成果。威斯騰生物始終緊跟相關領域前沿技術,立志為國內所有科研人員提供最先進的技術服務以及產業化合作。

        服務流程



        威斯騰生物服務項目

        分子生物學類 蛋白質與免疫學 動物實驗
        實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
        免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
        ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
        生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
        雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
        染色質免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
        GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型

        SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型


        高血壓模型
        病毒類 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
        過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
        過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
        逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
        腺相關病毒包裝純化
        肺炎大鼠模型


        肝炎-肝硬化-肝癌模型
        蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
        細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
        生長因子芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
        信號通路磷酸化水平檢測芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
        BioPlex懸浮芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
        生長因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
        炎癥因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
        血管生成因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
        凋亡因子芯片
        基因編輯動物
        趨化因子芯片 電生理相關服務 動物整體實驗服務
        HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 膜片鉗實驗
        細胞生物學 高通量測序 代謝組學
        細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
        MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
        細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
        細胞周期檢測 RNA-Seq測序
        細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
        Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
        流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
        CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
        臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
        藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
        細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
        細胞劃痕實驗
        條件性敲除小鼠/大鼠
        細胞生物學整體實驗
        全基因敲除小鼠/大鼠
        細胞成管實驗

        病理類 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
        掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
        透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
        HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
        免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
        Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
        激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
        免疫熒光

        Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
        原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
        熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
        特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)

        行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
        水迷宮實驗 高通量自動藥物篩選平臺 神經系統藥物藥效學評價
        曠場實驗 細胞高內涵藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
        重復性刻板行為檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 心血管系統藥物藥效學評價
        動物跑臺檢測 分子藥理研究平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
        強迫游泳 生物膜片鉗藥物篩選平臺 內分泌系統藥物藥效學評價

        常規藥物體外篩選 抗炎免疫藥物藥效學評價

        【本平臺合作項目】

        分子生物學、細胞生物學、病理染色檢測、細胞敲除&敲入、模式與轉基因動物、SPF動物保種、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!

        【全國免費熱線】:400-675-6758

        【電話】 023-65316016,023-65316556

        【郵箱】 china-western@163.com

        【官網網址】www.cbaoxing.com

        【地址】 重慶市高新區二郎創業大道高科創業園D棟2樓

        综合图区卡通动漫清纯丝袜,青青国国产视在线播放观看91,欧洲亚洲中文中韩,亚洲成女人图区,黄字幕yellow91国产,欧美 日产 国产 首页,小草在线资源视频免费观看