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        威斯騰公眾號

        CRISPR/Cas9細胞敲除/入
        CRISPR /Cas9 miRNA、lncRNA 敲除細胞系

        時間:2020-07-17 16:39:00 瀏覽:2588次


        產品介紹

        基因敲除敲入技術一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯騰生物利用最新的CRISPR/Cas系統可以有效的實現對細胞系特定基因的敲除和定點突變。

        近10年來,mRNA在醫學應用領域取得顯著進展。研究人員可快速合成任意序列的mRNA片段,并能保存在室溫條件下。在無細胞的體系中利用DNA轉錄生成cap和poly A修飾的mRNA分子穩定性良好,而修飾堿基的mRNA在穩定性上更獲得大幅提升。在研究基因敲除動物及其胚胎發育中的基因表達時,科研人員往往都采用卵母細胞的mRNA顯微注射的方法,該方法在ZFN、TALEN、CRISPR、重編程細胞多能性等技術中得到廣泛應用。在這些基因編輯過程中使用mRNA較之DNA有諸多優點,例如無需進入核內并轉錄效率更快,RNA易降解也避免基因組遺傳重組現象。

        我們利用該技術,定點敲除和修飾各種細胞系中的特定基因。對打靶細胞進行藥物篩選,利用CRISPR/Cas系統獲得的基因敲除細胞的剔除效率會明顯高于常規的利用RNAi和shRNA介導的基因敲落。


        技術特色

        1.可實現多個靶基因位點及多個基因的同時敲除
        2.最新Nickase酶/雙gRNA技術,顯著降低脫靶率
        3.無種屬限制,適用于各種細胞系的靶向敲除


        操作流程

        靶向目標序列sgRNA的設計及載體構建

        目標細胞系共轉染

        陽性細胞株的篩選和鑒定


        應用范疇

        基因功能分析:在細胞水平研究基因的功能

        定點突變:建立點突變細胞,可用于藥物靶點研究。

        啟動子功能分析:該方法建立的啟動子分析系統,可有效地分析內源性啟動子的強度,是一種最理想的分析系統。


        參考細胞系

        腫瘤細胞系: BEL-7402人肝癌細胞 CNE人鼻咽癌細胞 Hela人宮頸癌細胞 MCF-7人乳腺癌細胞等

        神經細胞系:SK-N-SH人神經母瘤細胞

        卵巢細胞系:SK-OV-3人卵巢癌細胞

        血管平滑肌細胞系:VSMC血管平滑肌

        成纖維細胞系:包皮成纖維細胞,心肌成纖維細胞

        肺細胞系:SK-MES-1人肺鱗癌細胞 NCI-H460人大細胞肺癌細胞 A549人非小細胞肺癌細胞

        腎細胞系:NRK腎小球足細胞

        巨噬細胞:MH-S小鼠肺泡巨噬細胞 RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 THP-1人單核巨噬細胞

        內皮細胞:HUVEC人臍靜脈內皮細胞

        ........

        具體CRISPR /Cas9細胞建系技術定制服務,歡迎聯系我們


        威斯騰實驗服務流程



        威斯騰生物服務項目

        分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
        實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
        免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
        ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
        生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
        雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
        染色質免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
        GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
        SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
        高血壓模型
        病毒包裝 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
        過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
        過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
        逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
        腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
        肝炎-肝硬化-肝癌模型
        蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
        細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
        BioPlex懸浮芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
        生長因子芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
        炎癥因子芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
        血管生成因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
        凋亡因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
        趨化因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
        HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 基因編輯動物
        電生理相關服務 動物整體實驗服務
        膜片鉗實驗
        細胞生物學檢測 高通量測序 代謝組學
        細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
        MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
        細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
        細胞周期檢測 RNA-Seq測序
        細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
        Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
        流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
        CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
        臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
        藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
        細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
        細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
        細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
        細胞成管實驗
        病理檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
        掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
        透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
        HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
        免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
        Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
        激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
        免疫熒光
        Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
        原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
        熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
        特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
        行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
        曠場實驗 高通量自動藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
        重復性刻板行為檢測 細胞高內涵藥物篩選平臺 心血管系統藥物藥效學評價
        動物跑臺檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
        強迫游泳 分子藥理研究平臺 內分泌系統藥物藥效學評價
        生物膜片鉗藥物篩選平臺 抗炎免疫藥物藥效學評價
        常規藥物體外篩選

        【本平臺合作項目】
        分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
        【全國免費熱線】400-675-6758
        【電話】 023-65316016,023-65316556
        【郵箱】 china-western@163.com
        【官網網址】www.cbaoxing.com
        【地址】 重慶市高新區二郎創業大道高科創業園D棟2樓   

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